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以下是豬甘油三酯(TG)ELISA試劑盒的實驗使用說明書綜合要點:
BS-4705 豬甘油三酯(TG)ELISA試劑盒
一、檢測原理
采用雙抗體夾心法,通過酶標儀測定450nm波長下OD值,顏色深淺與TG濃度呈正相關。
二、試劑盒組成
包被抗體微孔板?:預包被豬TG特異性抗體
酶標抗體?:HRP標記的TG抗體
標準品?:濃度梯度校準液(需按說明書稀釋)
TMB顯色液/終止液?:含底物和酸性終止劑
洗滌緩沖液?:20×濃縮液需蒸餾水稀釋
三、樣本處理
血清/血漿?:3000rpm離心10分鐘,避免溶血
組織勻漿?:按1:5~10比例(重量/體積)加入PBS勻漿,8000g離心取上清
細胞上清?:直接檢測或-20℃保存(避免反復凍融)
四、操作步驟
平衡試劑?:冷藏試劑需室溫平衡15-30分鐘
加樣?:
標準品孔:梯度加入50μL不同濃度標準液
樣本孔:加入50μL待測樣本
孵育?:37℃反應30-60分鐘,洗滌5次
顯色?:每孔加TMB底物100μL,避光反應15分鐘
終止與讀數?:加終止液50μL,15分鐘內測450nm OD值
五、注意事項
質量控制?:每板需設空白孔、標準曲線復孔
干擾因素?:樣本中TG含量過高需稀釋(計算時乘以稀釋倍數)
儲存條件?:未開封試劑2-8℃保存,開封板條需密封防潮
安全提示?:廢棄物按生物危害物處理
六、技術參數
檢測范圍?:通常為0.312-20ng/mL(不同品牌可能有差異)
靈敏度?:檢出限約0.1ng/mL
完整操作請以具體試劑盒說明書為準,部分品牌提供96孔/48孔兩種規格。
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